什么是色谱离子交换? +示例

什么是色谱离子交换? +示例
Anonim

回答:

它是基于它们的电荷和与材料的结合特性分离不同蛋白质的方法。

说明:

在不同的pH下,不同的蛋白质携带不同的电荷通过将蛋白质混合物置于设定的pH值,您可以得到含有不同电荷特性的蛋白质的混合物。

如果将这种蛋白质混合物倒在含有带电荷的物质的色谱柱上,色谱柱将结合相反电荷的蛋白质。

然后,您可以使用含有不同离子量的不同溶液从色谱柱中洗脱(解除)蛋白质。

例如,假设您有一种蛋白质混合物,您希望从中混合特定蛋白质。如果您知道在特定pH值下您感兴趣的蛋白质带正电荷,您可以将混合物倒入含有带负电荷物质的色谱柱上。

所有不带电荷或带负电荷的蛋白质都会直接流过色谱柱。然后,您可以通过用正离子充满色谱柱来释放带正电荷的蛋白质,这将完成色谱柱上的负电荷。然后,这种竞争将导致您感兴趣的蛋白质被洗脱。

以下是这种情况的一个例子。

每个托盘都含有不同浓度的缓冲液,从175 mM样品(左上角)可以看出,由于缓冲液中的离子和用于膜上带电结合位点的蛋白质(缓冲液中的离子已“获胜”,因为它们中有更多,因此它们阻止了蛋白质的结合)。在右下方的样品中,许多蛋白质已与膜结合,因为存在较少的离子以竞争结合位点。

在本视频中,您可以看到阴离子交换色谱操作: