为什么GAPDH用于Western Blot? +示例

为什么GAPDH用于Western Blot? +示例
Anonim

回答:

GAPDH通常用作加载控件。

说明:

在Western印迹中,我们经常使用GAPDH作为上样对照。这意味着通过探测GAPDH,我们可以检查我们在印迹的不同泳道上是否有相当数量的蛋白质。

一个使用的例子 - 说我们有一种疾病,我们认为导致细胞中特定蛋白质的升高。我们将从“健康”细胞和“患病”细胞的另一个样本中制作样本。然后我们将两个样品的等量蛋白质加载到凝胶上用于Western印迹。

在探测我们感兴趣的蛋白质的印迹后,我们发现在患病细胞中蛋白质水平确实升高(即在印迹上产生较暗的条带)。为了证明蛋白质的这种增加是由于细胞中表达的变化,而不是加载假象(也就是说,更强的条带是由细胞中蛋白质表达的变化引起的,而不是由于我们意外加载更多“疾病”样本比“健康”样本我们还将探测GAPDH的印迹,以显示两种泳道中的总蛋白水平相同。

因此,通过这样做,我们显示在两个泳道中已经加载了等同的蛋白质,并且我们观察到的条带强度的变化是由于感兴趣的蛋白质的蛋白质表达的变化。