为什么必须使用相同的限制酶切割(切割)用于产生转基因生物的两种生物的DNA?

为什么必须使用相同的限制酶切割(切割)用于产生转基因生物的两种生物的DNA?
Anonim

回答:

见下文…

说明:

限制酶在特定序列切割,因此必须使用相同的限制酶,因为它将产生具有相同互补粘性末端的片段,使得可以在它们之间形成键。

某些兼容的限制性站点可以一起使用。 Xho1和Sal1是例子。它们的粘性末端匹配,因此它们可以结合在一起。但结扎会杀死Xho1和Sal1位点,因此您不能再使用其中任何一种(在结扎位置)。

您也可以使用核酸外切酶或PCR来制造最粘性的末端(5 或3 突然变成钝的部位 - 这样你可以结扎成钝的切割部位 - 但这通常会杀死钝的部位。